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活体电穿孔

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活体动物免疫仪
产品货号:IVES31
品牌:启文生物/Qivon


IVES31主机面板图示如上,电源开关在背部面板右下方,正面板的左部和中部有三个操控按键和旋钮,分别负责调整脉冲电压数值、脉冲持续时间和脉冲次数。右下部有一个红色按键,负责程序运行的一键启动


针头电极



在体外和体内的电穿孔实验中使用的电极类型完全不同。在细胞悬浮液中进行的电穿孔实验中,电极通常由两块平行金属板或者同轴金属圆环组成,在电压作用下可以产生非常均匀的电场;但是对于活体电穿孔实验,平行金属板或者同轴金属圆环不适用,应该使用针头电极。针头电极由两排平行的特制金属针组成,用于在动物活体的肌肉内或皮肤内进行药物或基因传递。用户可以根据不同活体组织的大小和形状特点选择合理的组合方式,包括排间距、针头数量和针头长度这三个参数的选择:





应用领域




本仪器用于体内药物或DNA免疫,提供肌内或真皮内的电穿孔解决方案,以产生最大的转染效率。在皮下或者肌肉中直接注射质粒DNA后,通过针头电极施加电脉冲程序,以促进细胞摄取和转染。周围组织中包括树突状抗原呈递细胞和间充质来源细胞在内的细胞被转染,基因表达刺激免疫系统对分泌的抗原作出反应。与简单注射质粒DNA相比,当通过电穿孔增强递送时,皮肤中的基因表达高出 100 倍。



技术参数




活体免疫仪的优势


活体免疫(又称DNA免疫,活体基因导入)是一种基于DNA免疫的技术,旨在通过向动物皮下,皮间,肌肉,脾脏等部位注入含有编码特定抗原的DNA序列的载体,激发机体产生特异性抗体,利用下游技术检测,分离纯化这些特异性抗体。(见中间图)。这一方法具有简单、快速、安全、通量高、特异性强等特点。尤其针对一些难于获得的靶点蛋白,比如跨膜蛋白,特有翻译后修饰的蛋白、毒性蛋白、不稳定或半衰期短的蛋白等,普通免疫方法的表达量低甚至难以表达。因此,在针对特定难表达蛋白的单克隆抗体开发过程中,DNA免疫是一种非常有前途的技术手段。


活体免疫仪的优势


前在DNA免疫中,对于免疫原的递送主要有以下这几种递送方式:
1、肌肉注射、电穿孔和基因枪。肌肉注射简单易操作,可以用到多种组织和器官,但是DNA用量大,需要大量佐剂加强免疫反应,而且表达量低。基因枪的DNA用量小,但对动物也有一定损伤,会产生炎症反应,同时需要高压氦气、金粉等耗材,操作繁琐,成本高,对操作者的熟练度有很高的要求。在抗体开发中考虑到时效性,电穿孔和基因枪是两种比较好的递送方式。相比其他两种技术路线,活体免疫仪(电穿孔)可以刺激范围较大的免疫反应,DNA用量也比较大,操作简便,抗体表达量高,有独特的技术优势。

2、在非病毒介导的体内基因表达技术中,用DNA直接注射肌肉是一种简单、廉价、安全的方法,但是经常因为基因表达量很低而达不到实验要求。活体电击可显著增强肌肉中的基因表达,使大动物产生免疫应答。Roos等研究者发现,相比于用DNA直接注射肌肉的方法,先注射再原位电击可以将外源基因的表达量提高100-1000倍。



实验效果示例


为了验证仪器的实验性能,本公司将 EVIS31 和某知名进口品牌的某型号仪器进行了对比实验。由于对启文生物 IVES31 性能未知,所以起始的稀释倍数较低,从血清浓度稍高时就开始检测。

       经 ELISA 检测当达到相同血清效价时,某进口品牌和启文生物 IVES31 对小鼠的免疫次数分别是10次和7次。实验结果证明,使用启文生物 IVES31 可以少使用质粒,减少免疫次数,缩短免疫周期,这对操作繁琐且价值昂贵的免疫实验来说非常有实际价值。


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