细胞电转缓冲液A-上海启文生物科技有限公司

电穿孔电融合

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细胞电转缓冲液A

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产品货号：CPB011
品牌：启文生物/Qivon

产品说明:该电转缓冲液采用独特配方，可以应用于人类T细胞的电转染实验。该产品可以减少电转过程中对T细胞的杀伤，同时电转后T细胞活力恢复更快。

一、使用效果

1、本电转缓冲液可以用于mRNA的电转

实例：静息状态的人T细胞在电转GFP mRNA 24小时后，使用荧光显微镜下观察，T细胞呈现绿色。

2、本电转缓冲液可以用于电转CRISPR／Cas9组份，实现T细胞基因编辑。

实例：使用CRISPR／Cas9敲除T细胞TCR。分离T细胞后使用Dynabeads激活。激活三天后，使用混有CRISPR／Cas9组份的电转缓冲液进行电转。电转完成后对T细胞进行培养。在激活第九天使用流式细胞术对基因编辑效率进行验证。

T细胞在激活第九天进行CD3染色，TCR敲除的T细胞CD3不能到达细胞膜，因此细胞染色为阴性。右图显示TCR敲除效率约为70%。

二、电转操作流程：

1.T细胞计数；
2.取一定数量的T细胞，离心收集（1500rpm，5min）；
3.离心后弃上清，使用T细胞电转缓冲液（4摄氏度）重悬细胞；
4.离心（1500rpm，5min）；
5.同样步骤再重复步骤3-4两次；
6.清洗完成后，使用100uL-200uL电转缓冲液重悬细胞；
7.设定电转参数；
8.将细胞悬液转移到电极杯杯内；
9.将电极杯放入电转槽；
10.启动电转；
11.电转完成后尽快将细胞转移到T细胞培养基中；
12.细胞培养。

三、产品规格：

货号	产品介绍
CPB011	电穿孔缓冲液，用于T细胞，100ml

四、使用范围：

本产品只能用于科研，不能用于临床。

五、保存条件：

1. 2 - 8℃，2年；

2. 每次使用均需要无菌操作，避免交叉污染。