植物种子中因含有大量的多糖和蛋白成分,采用基于盐酸胍的传统RNA提取方法(如Trizol法)无法分离去除这些杂志成分,提取的RNA得率和纯度均非常低。本公司研发的预处理液可有效去除植物种子(拟南芥,水稻,玉米,大豆等)中的淀粉、蛋白和脂类成分。结合本公司的总RNA提取液使用,可分离得到高纯度的总RNA,并且适用于后续的Northern杂交,mRNA纯化,RT-PCR和cDNA克隆等操作。
产品规格:
货号 |
成分 |
描述 |
规格 |
RST010 |
RT010 |
总RNA提取液 |
100ml |
SP011 |
种子预处理液 |
30ml |
操作流程:
1、100-200mg种子组织粉末中加入300μL预处理液,充分震荡混匀。(请勿使用超过200 mg的组织,过量将会导致杂质去除不尽)
2、加入300μL酚仿溶液(苯酚:氯仿=1:1),再次充分震荡混匀。
3、4℃下13,000rpm离心10分钟,将上清转移至新的离心管中。
4、加入1mL的RNA提取液,混匀后室温放置5分钟,然后加入200μL氯仿,再次震荡混匀。
5、4℃下13000rpm离心10分钟,将上清转移至新的离心管中。
6、加入2/3上清体积的异丙醇,混匀后室温下放置5分钟充分沉降RNA。
7、4℃下13000rpm离心10分钟,弃上清。
8、加500μL 75%酒精,13000rpm离心5分钟,弃液体。超净台中吹干后加入50μL DEPC.H2O溶解即可。(注意不要过度干燥RNA沉淀,会导致RNA极度难溶)
注意事项:
l RNA提取过程中所用器皿、耗材等应保证无RNA酶污染,防止外源性RNA酶污染样品导致RNA样品降解。
l 试剂中含有腐蚀性物质,注意个人防护。
储存条件:4℃避光保存,有效期一年。