产品保存：试剂盒在室温(15-25℃) 干燥条件下保存一年。
产品说明：本试剂盒采用改良的碱裂解法裂解大肠杆菌细胞，利用硅胶膜离心柱特异地吸附 DNA，可从< 20 mL LB 培养基培养的大肠杆菌细胞中高效地提取质粒 DNA，最大提取量可达40 μg。溶液包含指示剂，通过颜色的变化，指示裂解、中和是否完全，从而保证质粒提取的质量，实验操作的可视化。提取的质粒 DNA 可直接用于酶切、连接、转化、测序等多种实验。
试剂盒组成：
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Component |
PP50 |
P0200 |
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Buffer P1 |
15 mL |
60 mL |
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Buffer P2 |
15 mL |
60 mL |
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Buffer N3 |
20 mL |
80 mL |
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Wash buffer |
10 mL |
40 mL |
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Elution Buffer |
5 mL |
10 mL |
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RNase A(10 mg/ml) |
150 uL |
600 uL |
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Collection Tubes |
50 个 |
200 个 |
注：使用前，将RNase A加入Buffer P2中，2-8℃保存；加入推荐体积的无水乙醇至Wash buffer中。
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LB Midea |
Buffer P1 |
Buffer P2 |
Buffer N3 |
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< 5 mL |
250 μL |
250 μL |
350 μL |
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5-10 mL |
500 μL |
500 μL |
700 μL |
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10-15 mL |
750 μL |
750 μL |
1050 μL |
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15-20 mL |
1000 μL |
1000 μL |
1400 μL |
操作步骤：
1、取过夜培养的菌液，10000 rpm 离心1分钟，去上清（尽量吸尽）。如果菌液量过大，可分多次离心收集。
2、根据上表，加入Buffer P1（含RNase A），振荡悬浮细菌沉淀，不要残留小的菌块。
3、根据上表，加入Buffer P2，温和地上下翻转混合4-6次，使菌体充分裂解，形成透亮的溶液。
4、根据上表，加入Buffer N3，轻轻混合5-6次，直至形成紧实的黄色凝集块，室温静置2分钟。
5、12000 rpm 离心5分钟，小心地吸取上清加入收集柱中。12000 rpm 离心1分钟，弃流出液。如上清体积大于800 μl，可以分多次加入收集柱中，并同上离心，弃流出液。
6、加入650 μL Wash buffer，12000 rpm 离心1分钟，弃流出液。
7、12000 rpm 离心1-2分钟，彻底去除残留的Wash buffer。
8、将收集柱置于一干净的离心管中，开盖静置1分钟，在柱的中央膜上加入30-50 μL 的 Elution Buffer 或 ddH2O，室温静置1分钟。10000 rpm 离心1分钟，洗脱 DNA，洗脱出的DNA 于-20℃保存。
注意事项：
-所有离心均在室温下进行。
-加入Buffer P2 或 Buffer N3后，操作一定要温和，剧烈混合会导致基因组污染。
-使用时，将试剂盒携带的 RNase A 全部加入到 Buffer P1 溶液中，混合均匀，2-8℃保存。
-检查 Buffer P2 是否由浑浊，如有可在37℃水浴中加热几分钟，使用后立即盖紧盖子，以免 pH 值发生变化。
-Buffer P1，Buffer P2，Buffer N3的用量请严格按照说明书，菌体量过大会导致裂解不充分，影响质粒 DNA 的得率及纯度。
