高分子β-淀粉样蛋白寡聚体ELISA试剂盒

\  产品描述

近年来,β-淀粉样蛋白(Aβ)寡聚体作为阿尔茨海默病因而倍受瞩目。众所周知,Aβ寡聚体是Aβ单体的可溶性凝集体,会抑制神经细胞的突触功能。
Aβ寡聚体中,按照分子量的大小,可以分成低分子量的Aβ寡聚体(Low-n 寡聚体)和高分子的Aβ寡聚体(ADDL、Aβ*56、原纤维(Profibril))。
有相关的报告指出,高分子Aβ寡聚体的Aβ*56(12-mer)对记忆损伤的影响极大1),在认知功能正常的成年人中,Aβ*56比二聚体、三聚体先增加并与Tau蛋白相关,二聚体、三聚体形式的Aβ不与Tau相关2)。

1) Lesné, S., et al.: Nature, 440, 7082, 352(2006).
2) Lesné, S. E., et al.: Brain,136, 1383(2013).

特点
可特异性地对9-mer以上的高分子Aβ寡聚体进行定量

试剂盒内容
① 抗体(BAN50)固相化96孔板——1个
② 标准溶液(10 nM)——100 μL
③ 缓冲液——60 mL
④ 生物素偶联抗体(BAN50)溶液——100 μL
⑤ 过氧化物酶偶联链霉亲和素溶液——100 μL
⑥ 显色剂1——6 mL
⑦ 显色剂2——6 mL
⑧ 洗涤液(10×)——100 mL
⑨ 封板贴——3张

试剂盒功能

※1 基于16-mer多抗原肽(MAP)标准品的换算值。
※2 不推荐使用血浆、血清作为样本。
※3 检测时需要准备酶标仪。

检测原理

这种使用抗Aβ抗体(BAN50)进行捕获和检测的的双抗体夹心法ELISA系列,与1-8-mer几乎不发生反应,与9-mer以上的Aβ寡聚体则发生特异性反应3)4)。
使用带有16个抗Aβ抗体(BAN50)的抗原决定簇的16-mer MAP作为标准品4)。


3)Fukumoto, H., et al.: FASEB J.,24, 2716(2010).
4)Kasai, T., et al.:  Biochem. Biophys.Res. Commun., 422, 3, 375(2012).

高分子Aβ寡聚体的特异性数据
将Aβ1-42冷藏于4℃并孵育一晚后,通过超滤将不足30kDa(8聚体以下)和大于等于30kDa(九聚体以上)的Aβ寡聚体分离,分别把回收到的片段进行Western Blot和本ELISA检测。

→八聚体以下(<30kDa)的Fraction B几乎检测不到信号;九聚体以上(≥30kDa)的Fraction A则检测到强烈的信号。

检测案例——人脑脊髓液
用本ELISA法和其他公司的产品分别对非认知症患者(Control)和阿尔茨海默病(AD)患者脑脊髓液中的Aβ寡聚体进行检测。

※4 MMSEscore:认知功能诊断问诊检查的评分
30-28分:正常;27-24分:怀疑有轻度认知障碍;23分以下:怀疑严重认知症
→本产品在检测非认知症患者(Control)和阿尔茨海默病患者(AD)二者时的检测值有明显差异。另外,比其他公司产品检测非认知症患者(Control)和阿尔茨海默病患者(AD)群也有更明显的差异。


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