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细胞电转缓冲液A

  • 细胞电转缓冲液A—CPB011.pdf

一、使用效果


1、本电转缓冲液可以用于mRNA的电转

     实例:静息状态的人T细胞在电转GFP mRNA 24小时后, 使用荧光显微镜下观察,T细胞呈现绿色。

2、本电转缓冲液可以用于电转CRISPRCas9组份,实现T细胞基因编辑。

     实例:使用CRISPRCas9敲除T细胞TCR分离T细胞后使用Dynabeads激活。激活三天后,使用混有CRISPRCas9组份的电转缓冲液进行电转。电转完成后对T细胞进行培养。在激活第九天使用流式细胞术对基因编辑效率进行验证


T细胞在激活第九天进行CD3染色,TCR敲除的T细胞CD3不能到达细胞膜,因此细胞染色为阴性。右图显示TCR敲除效率约为70%



二、电转操作流程:

1.T细胞计数;
2.取一定数量的T细胞,离心收集(1500rpm,5min);
3.离心后弃上清,使用T细胞电转缓冲液(4摄氏度)重悬细胞;
4.离心(1500rpm,5min);
5.同样步骤再重复步骤3-4两次;
6.清洗完成后,使用100uL-200uL电转缓冲液重悬细胞;
7.设定电转参数;
8.将细胞悬液转移到电极杯杯内;
9.将电极杯放入电转槽;
10.启动电转;
11.电转完成后尽快将细胞转移到T细胞培养基中;
12.细胞培养。



三、产品规格:

货号

产品介绍

CPB011

电穿孔缓冲液,用于T细胞,100ml


四、使用范围:

本产品只能用于科研,不能用于临床。


五、保存条件:

1. 2 - 82年;

2. 每次使用均需要无菌操作,避免交叉污染。



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